Elektroforēze: kas tas ir, kam tas paredzēts un kā tas tiek darīts

Saturs

• Kam tas paredzēts
• Kā tas tiek darīts
• Elektroforēzes veidi
• 1. Hemoglobīna elektroforēze
• 2. Olbaltumvielu elektroforēze

Elektroforēze ir laboratorijas paņēmiens, kas tiek veikts ar mērķi atdalīt molekulas pēc to lieluma un elektriskā lādiņa, lai varētu noteikt slimību diagnozi, pārbaudīt olbaltumvielu ekspresiju vai identificēt mikroorganismus.

Elektroforēze ir vienkārša un lēta procedūra, ko izmanto laboratorijas rutīnā un pētniecības projektos. Atkarībā no elektroforēzes mērķa, lai noteiktu, piemēram, diagnozi, var būt nepieciešams veikt citus testus un eksāmenus.

Kam tas paredzēts

Elektroforēzi var veikt dažādiem mērķiem gan pētniecības projektos, gan diagnostikā, jo tā ir vienkārša un lēta tehnika.Tādējādi elektroforēzi var veikt, lai:

• Identificējiet vīrusus, sēnītes, baktērijas un parazītus, un šis pielietojums ir biežāk sastopams pētniecības projektos;
• Paternitātes pārbaude;
• Pārbaudiet olbaltumvielu izpausmi;
• Identificēt mutācijas, kas noder, piemēram, leikēmijas diagnosticēšanai;
• Analizēt cirkulējošā hemoglobīna veidus, kas ir noderīgi sirpjveida šūnu anēmijas diagnostikā;
• Novērtējiet olbaltumvielu daudzumu asinīs.

Saskaņā ar elektroforēzes mērķi, lai pabeigtu diagnozi, ārstam var būt nepieciešams veikt citus papildu testus.

Kā tas tiek darīts

Elektroforēzes veikšanai ir nepieciešams gēls, kas var būt poliakrilamīds vai agaroze atkarībā no mērķa, elektroforēzes buferis un tvertne, molekulmasas marķieris un fluorescējoša krāsviela papildus UV vai LED gaismas iekārtai, kas pazīstama arī kā transiluminators.

Pēc želejas sagatavošanas jānovieto īpašs priekšmets, lai akas būtu izveidotas želejā, tautā sauktas par ķemmi, un ļautu želejai sastingt. Kad gēls ir gatavs, vienkārši uzklājiet vielas uz iedobēm. Lai to izdarītu, vienā no iedobēm jāievieto molekulmasas marķieris, pozitīvā kontrole, kas ir viela, kas ir zināma, kas tā ir, negatīva kontrole, kas garantē reakcijas derīgumu, un analizējamie paraugi. Visi paraugi jāsajauc ar fluorescējošu krāsu, jo tādā veidā ir iespējams vizualizēt joslas uz transiluminatora.

Gels ar paraugiem jāievieto elektroforēzes tvertnē, kas satur specifisko buferšķīdumu, un pēc tam ierīce tiek ieslēgta tā, lai būtu elektriskā strāva un līdz ar to arī potenciālu starpība, kas ir svarīga atdalīšanas daļiņām atbilstoši to īpašībām. slodze un lielums. Elektroforēzes darbības laiks mainās atkarībā no procedūras mērķa un var ilgt līdz 1 stundai.

Pēc noteiktā laika ir iespējams apskatīt elektroforēzes rezultātu caur transiluminatoru. Kad želeja ir pakļauta UV vai LED gaismai, ir iespējams vizualizēt joslu modeli: jo lielāka molekula, jo mazāka tās migrācija, tuvojoties akai, savukārt, jo vieglāka molekula, jo lielāks ir migrācijas potenciāls.

Lai reakcija tiktu apstiprināta, pozitīvās kontroles joslas ir jā vizualizē un negatīvajā kontrolē neko nedrīkst vizualizēt, jo pretējā gadījumā tas liecina par piesārņojumu, un viss process jāatkārto.

Elektroforēzes veidi

Elektroforēzi var veikt dažādiem mērķiem, un atbilstoši tās mērķim var izmantot vairāku veidu želejas, no kurām visizplatītākās ir poliakrilamīds un agaroze.

Elektroforēzi mikroorganismu identificēšanai biežāk veic pētniecības laboratorijās, tomēr diagnostikas nolūkos elektroforēzi var izmantot, lai identificētu hematoloģiskās slimības un slimības, kas attīstās, palielinoties olbaltumvielu daudzumam, kas ir galvenie elektroforēzes veidi:

1. Hemoglobīna elektroforēze

Hemoglobīna elektroforēze ir laboratorijas metode, kas tiek veikta, lai identificētu dažādus asinīs cirkulējošus hemoglobīna veidus, ļaujot identificēt ar hemoglobīna sintēzi saistītās slimības. Hemoglobīna veidu identificē, izmantojot elektroforēzi noteiktā pH, ideālā gadījumā no 8,0 līdz 9,0, ar joslu modeli, kuru var salīdzināt ar parasto modeli, ļaujot identificēt patoloģiskus hemoglobīnus.

Kam tas ir paredzēts: Hemoglobīna elektroforēzi veic, lai pētītu un diagnosticētu ar hemoglobīna sintēzi saistītās slimības, piemēram, sirpjveida šūnu anēmiju un hemoglobīna C slimību, turklāt tā ir noderīga talasēmijas diferencēšanā. Uzziniet, kā interpretēt hemoglobīna elektroforēzi.

2. Olbaltumvielu elektroforēze

Olbaltumvielu elektroforēze ir eksāmens, ko ārsts pieprasa, lai novērtētu asinīs cirkulējošo olbaltumvielu daudzumu un tādējādi identificētu slimības. Šo pārbaudi veic no asins parauga, ko centrifugē, lai iegūtu plazmu - asins daļu, kas, cita starpā, sastāv no olbaltumvielām.

Pēc elektroforēzes var vizualizēt joslu modeli un pēc tam grafiku, kurā norādīts katras olbaltumvielu daļas daudzums, kas ir būtisks diagnozes noteikšanai.

Kam tas ir paredzēts: Olbaltumvielu elektroforēze ļauj ārstam izpētīt multiplās mielomas, dehidratācijas, cirozes, iekaisuma, aknu slimību, pankreatīta, vilkēdes un hipertensijas gadījumus pēc joslas modeļa un diagrammas, kas sniegta pārbaudes ziņojumā.

Izprotiet, kā tas tiek darīts, un kā saprast olbaltumvielu elektroforēzes rezultātu.